مطالعۀ ژنومی ناتوکیناز جداشده از باسیلهای خاک و کلونکردن آن در باکتری اشریشیا کلی بهمنظور استفادۀ دارویی. (Arabic)

The Genomic Study of Nattokinase Isolated from Soil Bacilli and its Cloning in Escherichia Coli for Medicinal Use. (English)

Introduction: Nattokinase is an enzyme extracted from Japanese food produced in the fermentation process. This enzyme has significant positive effects in the treatment of cardiovascular diseases, the treatment or prevention of amyloid diseases such as Alzheimer disease and the reduction of blood cholesterol. This genomic study aimed to investigate the Nattokinase isolated from soil bacilli in areas around Tehran and its cloning in Escherichia coli bacteria for medicinal use. Materials and methods: In this study, 60 samples were collected from 5-10 cm depth of soil of different areas around Tehran and their Bacillus bacteria were isolated by molecular and biochemical methods. By the PCR method, the bacteria with the Nattokinase gene were identified and the amplified gene was cloned into E. coli and sequenced. The gene expression was then evaluated by Real Time PCR and its phylogenetic relationships were determined. Results: As a result of screening soil samples sent to the laboratory, a total of 12 suspected colonies were isolated from Gram-positive bacilli which were identified based on morphological, microscopic, and biochemical tests. Then, 11 species was determined as target genes. The cloning and expression of Nattokinase gene were successfully performed and the homology of 99-100% with other enzymes was observed. Discussion and conclusion: In the present study, the Nattokinase gene from Bacillus subtilis RH5 isolated from soils around Tehran was successfully cloned into PTG19-T expression vector. The successful expression of its gene showed that it could be expanded by this method for industrial production. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

مقدمه: ناتوکیناز، آنزیمی استخراجشد از غ ایی ژاپنی است که ار فرایند تخمیر آن تولید میشوا؛ ایی آنیزیم آریار مثبت ارخور توجهی ار ارمان بیماریهای قلبی عروقی، ارمان یا پیشگیری از بیماریهای آمیلوئیدی همچون آلزایمر و کاهش کلسترو خون اارا. مطالعۀ حاضر ار نظر ااشته تا به مطالعۀ ژنومی ناتوکیناز جداشید از باسیی های خیا مناطق اطراف تهران و کلونکران آن ار باکتری اشریشیا کل یبهمنظور است ااۀ اارویی بپراازا. مواد و روشها: ار مطالعۀ حاضر، 60 نمونه از عمق 5 تا 10 سانتیمتری خا منیاطق مختلیا اطیراف شیهر تهیران نمونهبرااری و باکتریهای باسیلوس آنها به رو های مولکولی و بیوشیمیایی جداسازی شدند. باکتریهیای اارای ژن مشخص شدند و ژن تکثیرشد ار باکتری اشریشیا کل یکلون و توالییابی شد؛ سپس بییان ژن PCR ناتوکینا زبه رو بررسی شد و روابط فیلوژنتیکی آن مشخص شدند. Real time PCR به رو نتایج: ارنتیجۀ غربا گری نمونههای خا ارسالی به آزمایشگا ، ارمجموع 12 کلنی مشیکو بیه باسیی های گیرم مثبت جداسازی شدند که بر اساس ویژگیهای ریختشناختی، میکروسکوپی و آزمونهای بیوشیمیایی تعییی هوییت شیدند و مشیخص شید 11 گونیه ژن هیدف را اارنید. کلیونکران و بییان ژن ناتوکینیا زبیهطور موفقییتآمیز انجیام و همولوژی 99 تا 100 ارصدی با سایر آنزیمها مشاهد شد. جداشید از خا هیای RH بحث و نتیجهگیری: ار بررسی حاضر، ژن ناتوکینا زاز باکتری باسییلوس سیوبتیلی س 5 کلون شد و بیان موفقییتآمیز ژن آن نشیان ااا بیا گسیتر PTG19-T مناطق اطراف تهران با موفقیت ار وکتور بیانی ای رو میتوان ار راستای تولید صنعتی ای آنزیم مهم گام برااشت. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of Biological Journal of Microorganism is the property of University of Isfahan and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)